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  • 酸性磷酸酯酶的组织定位

    一.服务介绍目的1.了解并掌握酸性磷酸酶定位的原理及操作步骤;2.观察酸性磷酸酶在细胞中的分布。原理酸性磷酸酯酶(AcidPhosphatase)存在于植物的种籽、霉菌、肝脏和人体的前列腺之中,能专一性地水解磷酸单酯键。PO43-+Pb(NO3)2-----Pb3(PO4)2↓(沉淀)Pb3(PO4)2+(NH4)2S----PbS↓(棕黑色)二.实验......

    2018-07-04
  • 小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

    一.服务介绍以下是根据NIH老年病研究所提供的英文的R1胚胎干细胞培养protocol整理而成。根据经验作部分修改。一般培养:保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片)二.实验方法体外分化方法注......

    2018-07-04
  • 动物细胞传代培养

    一.服务介绍细胞传代培养的原理:细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,须进行传代再培养。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。二.实验方......

    2018-07-04
  • 慢病毒转染胶质瘤干细胞

    一.服务介绍红色荧光蛋白(redflorescenceprotein,RFP)是细胞研究的常用蛋白标记,是细胞生物学示踪研究中的重要标记物,荧光显微镜下可被直接观察,因此被广泛用于肿瘤的生长、浸润及血管发生等追踪性研究[。质粒转染和病毒转染是将RFP转染到细胞内的常用方法。慢病毒作为一种较新的病毒载体,具有转染能......

    2018-07-04
  • 细胞凋亡

    一.服务介绍【细胞凋亡技术背景】在多细胞生物发育过程中,一些不需要的细胞会以一种自主的方式死亡并被机体清除,这个过程被称为程序性细胞死亡(programmedcelldeath)。程序性细胞死亡多以细胞凋亡(apoptosis)的机制发生。除细胞凋亡外,细胞死亡还包括坏死(necrosis)和自噬性细胞死亡(autophagiccell......

    2018-07-04
  • 转染细胞的稳定筛选

    一.服务介绍什么是瞬时转染和稳定转染?答:瞬时转染:顾名思义,外源片段的表达时间短暂。这主要是因为外源导入的裸露的载体整合入基因组的几率非常低,所以以染色体外(episomal)形式存在,不能随细胞分裂而一同复制导致最后拷贝数被稀释导致的。而且考虑到细胞分裂会稀释质粒的量,所以起初转染的质粒拷......

    2018-07-04
  • 重组子的检测

    一.服务介绍[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。通过本实验学习重组质粒的检测技术。[基本原理]聚合酶链反应(polymerasechainreaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种技术。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物,经变性、退火和延伸若干个循环后,DNA......

    2018-07-04
  • RbCl超级感受态细胞

    一.服务介绍目前,感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方法制备,即用低渗CaCl2溶液在低温(0℃)时处理快速生长的细菌,从而获得感受态细菌。此时细菌膨胀成球形,外源DNA分子在此条件下易形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附在细菌表面,通过热激作用促进细胞对DNA的吸收。转化效率可达106-107......

    2018-07-04
  • 感受态细胞制备原理及方法(CaCl2法)

    一.服务介绍目前,感受态细胞的制备常用冰预冷的CaCl2处理细菌的方法制备,即用低渗CaCl2溶液在低温(0℃)时处理快速生长的细菌,从而获得感受态细菌。此时细菌膨胀成球形,外源DNA分子在此条件下易形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附在细菌表面,通过热激作用促进细胞对DNA的吸收。转化效率可达106-107转......

    2018-07-04
  • 逆转录病毒载体介导DNA转染

    逆转录病毒载体介导DNA转染一.服务介绍逆转录病毒载体属RNA病毒,但可在受染细胞内反转录产生DNA互补链,此DNA单链可作为模板合成第二条DNA链,第二条DNA链可掺入细胞基因组DNA中。此病毒可利用宿主细胞的酶自行转录与复制,RNA可合成蛋白,再包装病毒,RNA从胞内释放,成为感染性病毒,该载体可经不同方式改......

    2018-07-04
  • 细胞分离技术

    一.服务介绍1.从原代组织中分离细胞将组织块分离(散)成细胞悬液的方法有多种,最常用的是机械解离细胞法、酶学解离细胞法以及螯合剂解离细胞法。从原代组织中获得单细胞悬液的一般方法是酶解聚。细胞暴露在酶中的时间要尽可能的短,以保持最大的活性。下列步骤可以解聚整个组织,获得较高产量的有活......

    2018-07-04
  • 细胞活力检测MTT的操作方法

    一.服务介绍1.MTT是什么MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。2.、MTT法用来做什么简单地说:是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT主要有两个......

    2018-07-04
  • 原代细胞培养

    一.服务介绍将动物各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,在合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。原代细胞分离培养与鉴定(鉴定可提供流式细胞仪检测、免疫细胞化学、RT-PCR、蛋白免疫印迹等多种方法检测)。......

    2018-07-04
  • 细胞转染

    一.服务介绍转染技术的选择对转染结果影响很大,许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例,细胞数量,培养及检测时间等。本公司主要的转染方法:脂质体转染法、电穿孔转染法、病毒感染法。其优劣:转染操作简便,价格低廉,但是对细胞毒性大,并且有些细胞通过脂质体转染效率很低;电转操作方便快捷,但是需要专门......

    2018-07-04
  • 细胞检测

    一.服务介绍1.MTT检测细胞增殖实验与细胞生长曲线实验;2.流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期实验;3.Transwell检测肿瘤细胞侵袭迁移实验;4.TUNEL实验;5.克隆形成实验。1.在培养目的细胞的同时进行药物处理或者病毒感染,确定实验方案;2.MTT检测、流式细胞仪检测、Transwell检测、克隆形成实验等;3.数据......

    2018-07-04
  • CCK8检测

    一.服务介绍CellCountingKit-8(简称CCK8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-MethoxyPMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原......

    2018-07-04
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